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移液器的校準方法和步驟

發(fā)布時間:2024/8/3點擊次數(shù):193

校準移液器是確保實驗結(jié)果準確性的重要步驟。以下是詳細的移液器校準方法和步驟:

一、校準前準備

工具和材料

  1. 精密天平(精度至少為0.01 mg)

  2. 蒸餾水或去離子水

  3. 量筒(用于測量蒸餾水)

  4. 校準砝碼(用于校準天平)

  5. 移液器吸頭(與移液器匹配的高質(zhì)量吸頭)

  6. 溫度計(測量水溫)

  7. 濕度計(測量環(huán)境濕度)

  8. 手套和防護裝備(確保操作無污染)

環(huán)境要求

  • 環(huán)境溫度:20°C ± 2°C

  • 環(huán)境濕度:50% ± 10%

  • 避免氣流、震動和電磁干擾

二、校準步驟

1. 校準前的準備

  • 確保移液器清潔且干燥。

  • 檢查移液器是否需要維護或更換密封圈。

  • 在開始校準前至少30分鐘,將所有工具和材料放置在實驗室環(huán)境中,使其達到環(huán)境平衡。

2. 天平校準

  • 打開天平,進行預熱(根據(jù)天平說明書的要求)。

  • 使用校準砝碼進行天平校準,確保天平讀數(shù)準確。

  • 確認天平校準完畢后,將天平調(diào)零。

3. 準備蒸餾水

  • 測量并記錄水溫(理想溫度為20°C)。

  • 根據(jù)溫度,查找水的密度(參考密度表)。

4. 吸取和稱量

  • 設置移液器至校準所需的體積(如10µL、100µL、1000µL)。

  • 選擇適配的吸頭,安裝到移液器上。

  • 使用正確的移液技術(shù)吸取水樣:

    • 將吸頭浸入水中2-3毫米。

    • 緩慢平穩(wěn)地吸取水樣。

    • 等待1-2秒,確保吸頭內(nèi)液體穩(wěn)定。

    • 將吸頭移到天平上方。

    • 緩慢釋放移液器按鈕,將水樣排到天平的稱量盤上。

  • 記錄天平讀數(shù)(質(zhì)量)。

5. 重復操作

  • 對每個體積進行至少10次重復操作,記錄每次稱量的質(zhì)量。

6. 計算體積

  • 使用以下公式計算每次稱量的體積:V=mρV = \frac其中,VV 是體積(µL),mm 是質(zhì)量(mg),ρ\rho 是水的密度(mg/µL,取決于水溫)。

7. 計算誤差

  • 計算每次測量的平均體積(Vˉ\bar)。

  • 計算標準偏差(SD):SD=(Vi?Vˉ)2n?1SD = \sqrt{\frac{\sum (V_i - \bar)^2}}其中,ViV_i 是每次測量的體積,nn 是測量次數(shù)。

  • 計算相對標準偏差(RSD):RSD=SDVˉ×100%RSD = \frac} \times 100\%

  • 計算系統(tǒng)誤差(系統(tǒng)誤差 = 平均體積 - 設定體積)。

三、評估結(jié)果

精度和準確度

  • 比較計算出的平均體積和設定體積的差異(系統(tǒng)誤差)。

  • 檢查相對標準偏差(RSD),確保在移液器規(guī)定的允許范圍內(nèi)。

調(diào)整移液器

  • 如果誤差超出允許范圍,根據(jù)移液器說明書進行調(diào)整(通常通過移液器上的調(diào)節(jié)螺釘)。

  • 調(diào)整后重新進行校準,直至誤差在允許范圍內(nèi)。

記錄和報告

  • 填寫移液器校準記錄表,包括每次測量的體積、平均體積、標準偏差和相對標準偏差。

  • 保存校準記錄,以備將來審查。

四、后續(xù)維護

定期校準

  • 根據(jù)使用頻率和實驗要求,定期校準移液器(通常每3-6個月一次)。

日常維護

  • 每次使用后清潔移液器,特別是在處理高風險樣本后。

  • 避免粗暴操作,正確存放移液器。

潤滑和維護

  • 定期使用適當?shù)臐櫥瑒?nèi)部機械部件進行潤滑,確保其靈活操作。

  • 檢查并更換磨損的密封圈和活塞。

五、常見問題及解決方法

漏液

  • 可能原因:吸頭安裝不正確、密封圈老化或移液器內(nèi)部部件損壞。

  • 解決方法:確保吸頭正確安裝,定期檢查和更換密封圈,必要時維修或更換內(nèi)部部件。

量程不準

  • 可能原因:移液器需要校準、操作方法不正確或移液器內(nèi)部污染。

  • 解決方法:重新校準移液器,確保正確操作,定期清潔移液器內(nèi)部。

吸液不均勻

  • 可能原因:吸頭問題、移液器污染或操作不當導致氣泡。

  • 解決方法:更換吸頭,清潔移液器,吸液時緩慢平穩(wěn)操作。

按鈕卡頓

  • 可能原因:按鈕或內(nèi)部部件磨損、污染或缺乏潤滑。

  • 解決方法:檢查并更換磨損部件,定期清潔和潤滑移液器。

吸液或排液困難

  • 可能原因:活塞或密封圈損壞、內(nèi)部堵塞。

  • 解決方法:檢查并更換損壞的活塞或密封圈,清潔移液器內(nèi)部。

通過上述步驟,可以確保移液器的精度和準確性,從而保證實驗結(jié)果的可靠性。如果在校準過程中遇到復雜或無法解決的問題,建議聯(lián)系廠家或?qū)I(yè)技術(shù)人員進行維護和維修。


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